Incremento da baciloscopia no diagnóstico de tuberculose pulmonar em pessoas privadas de liberdade / Increment of the microscopy in the diagnosis of pulmonary tuberculosis in inmates

Objetivo: Avaliar um procedimento de fácil execução e baixo custo para incrementar o diagnóstico da tuberculose entre pessoas privadas de liberdade sem riscos de contaminação para profissionais de laboratório. Métodos: Amostras de escarro foram analisadas por baciloscopia após tratamento com hipoclorito de sódio e sedimentação espontânea em comparação à baciloscopia direta convencional, cultura pelo método Ogawa-Kudoh e o teste molecular rápido pelo sistema Xpert®MTB/RIF. Para as análises estatísticas foram empregados os programas Open Epi e SPSS. Resultados: De 436 amostras de escarro submetidas ao cultivo 71 foram positivas (verdadeiros positivos) e dessas 50 foram positivas pela baciloscopia direta convencional e 67 pela baciloscopia do escarro processado, o que corresponde a um incremento de 29% na positividade. Conclusão: O procedimento proposto preserva as vantagens e aumenta a sensibilidade da baciloscopia direta convencional. A implementação dessa técnica para diagnóstico entre grupos vulneráveis em locais de acesso e recursos limitados poderá aumentar a identificação de casos de tuberculose pulmonar.

Microscopic detection of Mycobacterium tuberculosis in direct or processed sputum smears

Abstract INTRODUCTION: Microscopic identification of active pulmonary tuberculosis (PTB) from direct smears of sputum (DS) is widely used for detection, but has limited sensitivity. Here, we assessed the yield of acid-fast bacilli (AFB) detection in processed sputum smears (PSS). METHODS: Sputum samples were simultaneously analyzed by direct sputum smearing and after chemical treatment and spontaneous sedimentation. RESULTS: Of the 1,719 samples analyzed, 16.4% were positive for AFB in conventional DS and 21.4% in PSS, corresponding to a 30% increase in detection. CONCLUSIONS: Increased sensitivity from analyzing PSS and better safety protocols will contribute to improved detection and control of the disease.

Seroprevalence and spatial distribution dynamics of Yersinia pestis antibodies in dogs and cats from plague foci in the State of Ceará, Northeastern Brazil

Abstract INTRODUCTION: In Brazil, the plague is established in several foci located mainly in the northeastern part of the country, where it alternates between active and quiescent periods. These foci in the State of Ceará have high epidemiological importance. In addition to other plague detection activities, plague areas can be monitored through serological surveys of dogs and cats (domestic carnivores), which, following feeding on plague-infected rodents, can develop mild to severe forms of the disease and produce long-lasting antibodies. This study aimed to characterize the circulation dynamics and spatial distribution of Yersinia pestis antibodies in dogs and cats in plague foci areas of Ceará. METHODS: An ecological study was conducted to analyze the temporal series and spatial distribution of secondary data obtained from domestic carnivore serum surveillance in Ceará's plague areas from 1990 to 2014. RESULTS: Joinpoint analysis revealed that the overall trend was a reduction in antibody-positive animals. The mean proportion of antibody-positivity during the whole study period was 1.5% (3,023/203,311) for dogs, and 0.7% (426/61,135) for cats, with more than 4% antibody-positivity in dogs in 1997 and 2002. Antibody titers ranging from 1/16 to 1/64 were frequent. Despite fluctuations and a significant reduction, in recent years, there were antibody-positive animals annually throughout the study period, and the localities containing antibody-positive animals increased in number. CONCLUSION: Yersinia pestis is actively circulating in the study areas, posing a danger to the human population.

Ehrlichia canis and Rickettsia spp. in dogs from urban areas in Paraiba state, northeastern Brazil / Ehrlichia canis e Rickettsia spp. em cães de áreas urbanas da Paraíba, nordeste do Brasil

Abstract The aims of our study was to identify Ehrlichia canis and antibodies against Rickettsia spp. belonging to the spotted fever group (SFG) in dogs sampled from Paraiba state, northeastern Brazil. Blood and serum samples collected by convenience from dogs in urban areas of five municipalities were analyzed by real-time PCR for the detection of E. canis DNA and by immunofluorescence assay test (IFAT) for the identification of antibodies against Rickettsia rickettsii, R. felis, R. parkeri, R. amblyommii and R. rhipicephali antigens. E. canis DNA was detected in 8.9% (64/719) of the blood samples, whereas 5.63% (43/763) of the serum samples were positive for at least one of the Rickettsia antigens tested by IFAT. This study showed for the first time the occurrence of E. canis and suggested the circulation of SFG Rickettsia in dogs in the study region of Paraiba state, northeastern Brazil.

Resumo Os objetivos do nosso estudo foram identificar Ehrlichia canis e anticorpos contra Rickettsia spp. pertencentes ao Grupo da Febre Maculosa (GFM) em cães amostrados no estado da Paraíba, nordeste do Brasil. As amostras de sangue e soro, coletados por conveniência, de cães em áreas urbanas de cinco municípios foram analisadas por PCR em tempo real para a detecção de DNA de E. canis e pela Reação de Imunofluorescência Indireta (RIFI) para identificação de anticorpos contra Rickettsia rickettsii, R. felis, R. parkeri, R. amblyommii e R. rhipicephali. O DNA de E. canis foi detectado em 8,9% (64/719) das amostras de sangue, enquanto que 5,63% (43/763) das amostras de soro foram positivas para pelo menos um dos antígenos de Rickettsia testados por RIFI. Este estudo mostrou pela primeira vez a ocorrência de E. canis e sugere a circulação de Rickettsia do GFM em cães na região em estudo do estado da Paraíba, Nordeste do Brasil.

Survey of Ehrlichia canis, Babesia spp. and Hepatozoon spp. in dogs from a semiarid region of Brazil / Pesquisa de Ehrlichia canis, Babesia spp. e Hepatozoon spp. em cães de uma região semiárida do Brasil

This study assessed the occurrence of Ehrlichia spp., Babesia spp. and Hepatozoon spp. infections in 100 tick-harboring dogs from a semiarid region of the State of Paraíba, Northeastern Brazil. Blood samples and ticks were collected from the animals, and a questionnaire was submitted to dog owners to obtain general data. Blood samples were used to perform hemogram, direct blood smear and immunological and molecular hemoparasite detection. The 1,151 ticks collected were identified as Rhipicephalus sanguineus; direct smears revealed E. canis-like morulae in the monocytes of 4% (4/100) of the non-vaccinated female dogs, and 34% and 25% of the dogs tested positive for Ehrlichia canis by indirect immunofluorescence assay (IFA) and polymerase chain reaction (PCR), respectively. Blood smear examination revealed Babesia-suggestive merozoites in the erythrocytes of 2% (2/100) of the animals. Babesia vogeli was detected by PCR in ten animals (10%) and was correlated with young age (p = 0.007) and thrombocytopenia (p = 0.01). None of the animals showed Hepatozoon spp. positivity. These results indicate that E. canis is the main tick-borne canine pathogen in the study area and provide the first report of B. vogeli infection in dogs from Paraiba State.

O presente estudo avaliou a ocorrência de infecção por Ehrlichia spp., Babesia spp. e Hepatozoon spp. em 100 cães, infestados por carrapatos, oriundos de uma região semiárida do Estado da Paraíba, Nordeste do Brasil. Amostras de sangue e de carrapatos foram coletadas dos animais, e um questionário foi submetido aos proprietários dos cães para obter dados gerais. As amostras de sangue foram utilizadas para realização de hemograma, esfregaço sanguíneo e detecção molecular dos hemoparasitos. Os 1.151 carrapatos coletados foram identificados como Rhipicephalus sanguineus; os esfregaços sanguíneos revelaram mórulas sugestivas de E. canis em 4% (4/100) de cães fêmeas não vacinadas, e 34% e 25% dos cães foram positivos para Ehrlichia canis pela imunofluorescência indireta (IFI) e reação em cadeia pela polimerase (PCR), respectivamente. Os esfregaços sanguíneos revelaram merozoítas sugestivas de Babesia em eritrócitos de 2% (2/100) dos animais. Babesia vogeli foi detectada por PCR em dez animais (10%) e foi correlacionada com a idade jovem (p=0,007) e trombocitopenia (p=0,01). Nenhum dos animais apresentou positividade para Hepatozoon spp. Esses resultados indicam que E. canis é o principal patógeno canino transmitido por carrapato, na área estudada, e fornece o primeiro relato de infecção por B. vogeli em cães do Estado da Paraíba.

Cutaneous leishmaniasis in northeastern Brazil: a critical appraisal of studies conducted in State of Pernambuco / Leishmaniose cutânea no nordeste do Brasil: uma avaliação crítica dos estudos realizados no Estado de Pernambuco

American cutaneous leishmaniasis (ACL) is a complex disease with clinical and epidemiological features that may vary from region to region. In fact, at least seven different Leishmania species, including Leishmania (Viannia) braziliensis, Leishmania (Viannia) guyanensis, Leishmania (Viannia) lainsoni, Leishmania (Viannia) naiffi, Leishmania (Viannia) shawi, Leishmania (Viannia) lindenbergi, and Leishmania (Leishmania) amazonensis, have been implicated in the etiology of ACL in Brazil, and numerous phlebotomine sandfly species of the genus Lutzomyia have been regarded as putative or proven vectors. Because ACL is a focal disease, understanding the disease dynamics at the local level is essential for the implementation of more effective control measures. The present paper is a narrative review about the ACL epidemiology in Pernambuco, northeastern Brazil. Furthermore, the need for more effective diagnosis, treatment, control and prevention strategies for the affected populations is highlighted. This paper will provide researchers with a critical appraisal of ACL in Pernambuco. Hopefully, it will also be helpful for public health authorities to improve current control strategies against ACL at the state and country levels.

A leishmaniose cutânea americana (LCA) é uma doença complexa com características clínicas e epidemiológicas que podem variar de região para região. De fato, pelo menos, sete diferentes espécies de Leishmania, incluindo Leishmania (Viannia) braziliensis, Leishmania (Viannia) guyanensis, Leishmania (Viannia) lainsoni, Leishmania (Viannia) naiffi, Leishmania (Viannia) shawi, Leishmania (Viannia) lindenbergi e Leishmania (Leishmania) amazonensis, têm sido incriminadas na etiologia da LCA no Brasil, e numerosas espécies de flebotomíneos do gênero Lutzomyia, foram considerados vetores suspeitos ou comprovados. Devido ao seu caráter focal, a compreensão da dinâmica da LCA a nível local é imprescindível para a implementação de medidas de controle eficazes. Este trabalho consiste de uma revisão narrativa sobre a epidemiologia da LCA em Pernambuco, nordeste do Brasil. Além disso, se enfatiza a necessidade de maior efetividade no diagnóstico, tratamento, controle e estratégias de prevenção para as populações afetadas. Este artigo fornecerá aos pesquisadores uma avaliação crítica da LCA em Pernambuco. Espera-se também contribuir com as autoridades de saúde pública no aprimoramento das estratégias atuais de controle da LCA nos níveis estaduais e nacional.

Biossegurança, Proteção Ambiental e Saúde: compondo o mosaico / Biosafety, Environmental Protection and Health: completing the puzzle

O presente trabalho faz uma reflexão sobre a construção do campo da Biossegurança, apresenta sua abrangência, os complexos temas tratados e sua perspectiva interdisciplinar. O objetivo desse campo é propor ações capazes de prevenir e controlar riscos de agravos à saúde ambiental e humana, respondendo aos desafios teóricos e práticos impostos pelas constantes mudanças no mundo, decorrentes das intervenções humanas sobre a natureza, mediadas pelos avanços científicos e tecnológicos. São abordadas questões que inserem a Biossegurança como ferramenta na busca de um modelo de desenvolvimento sustentável, resgatando a relação entre degradação ambiental, condições precárias de saúde e controle do surgimento e ressurgimento de doenças nas populações.

This work reflects on the development of the field of Biosafety. The scope of this field is presented, as well as its complex themes and its interdisciplinary perspective. The scope of this field is to propose actions capable of preventing and controlling the risk of worsening human and environmental health. This is done in order to provide alternatives to the theoretical and practical challenges posed by the rapid changes in the world, resulting from human intervention in nature and mediated by scientific and technological advances. We address questions that place Biosafety as a tool in the search for a model of sustainable development, establishing the relationship between environmental degradation, precarious health conditions, and control of the emergence and reemergence of diseases in populations.

Soroprevalência da infecção por hantavírus em roedores do estado do Ceará, Brasil / Seroprevalence of hantavirus infection in rodents from the State of Ceara, Brazil

A síndrome pulmonar cardiovascular por hantavírus (SPCVH) e a peste (infecção pela Yersinia pestis) são zoonoses que ocorrem no Brasil. As áreas de distribuição dos dois agravos poderão se sobrepor, pois eles compartilham os mesmos reservatórios. Nosso objetivo foi analisar a prevalência de anticorpos contra hantavírus em roedores de áreas focais de peste no estado do Ceará. A amostra foi composta por 239 animais: 136 Necromys lasiurus, 31 Oligoryzomys nigripes, 33 Oryzomys subflavus, 4 Holochilus sciureus, 24 Rattus rattus, 1 Mus musculus, 8 Trichomys apereoides e 2 Galea spixii. Os soros de dois N. lasiurus capturados na serra da Ibiapaba apresentaram anticorpos anti-hantavirus, evidenciando que as populações humanas dessas áreas estão sob risco de contrair uma infecção potencialmente letal, o que requer a estruturação de um programa de pesquisas com o objetivo de estudar sistematicamente a hantavirose.

The hantavirus cardiovascular pulmonary syndrome (HCVPS) and the plague (Yersinia pestis infection) are zoonoses that occur in Brazil, having in common rodent reservoirs. Therefore their distribution areas may overlap. The prevalence of hantavirus antibodies in animals caught in the routine activities of the Plague ControlProgram (PCP) in the State of Ceará in the period from 2002 to 2005 was analyzed in the rodent population in the plague areas. The sample consisted of 239 animals: 136 Necromys lasiurus, 31 Oligoryzomys nigripes, 33 Oryzomys subflavus, 4 Holochilus sciureus, 24 Rattus rattus, 1 Mus musculus, 8, Trichomys apereoides and 2 Galea spixii. Two N. lasiurus captured in the Serra da Ibiapaba were positive forhantavirus antibodies, indicating that humans in these areas are at risk of contracting a potentially lethal infection what justifies the implementation of a research program to study systematically the hantaviruses and rodent hosts in this area.

Prevalência de anticorpos contra Yersinia pestis em carnívoros domésticos nos focos pestosos, do Estado do Ceará / Prevalence of antibodies against Yersinia pestis in domestic carnivores, in plague foci in the State of Ceará

Analisou-se a prevalência de anticorpos contra Yersinia pestis em carnívoros domésticos (cães e gatos) nas áreas pestígenas do Estado do Ceará, visando estabelecer a importância do monitoramento desses animais na rotina do Programa de Controle da Peste. No decênio 1997-2006, analisaram-se 146.732 amostras de soros (95.883 cães e 50.849 gatos), das quais 2.629 (2.234 cães e 395 gatos) revelaram-se positivas. A prevalência entre os cães (85 por cento) foi superior a dos gatos (15 por cento) em todo o decênio e locais, exceto em Ibiapina, em 1998. O significado desses achados ainda não foi determinado. Os estudos sobre a zoonose no Brasil pautaram-se por paradigmas que não contemplavam todos os elementos envolvidos na zoonose, impossibilitando a devida elucidação do papel desses carnívoros. O monitoramento da atividade pestosa, realizado exclusivamente por inquéritos caninos, pode redundar no desconhecimento progressivo da situação epidemiológica da peste, caso não sejam desenvolvidas pesquisas interinstitucionais suplementares.

The prevalence of antibodies against Yersinia pestis in domestic carnivores (dogs and cats), in plague areas in the State of Ceará, was analyzed to establish the importance of monitoring these animals within the routine practice of the plague control program. Over the decade 1997-2006, 146,732 serum samples were examined (95,883 from dogs and 50,849 from cats), of which 2,629 (2,234 from dogs and 395 from cats) proved to be positive. The prevalence among dogs (85 percent) was higher than among cats (15 percent) throughout the decade and in all places, except in Ibiapina in 1998. The significance of these findings has not yet been determined. Studies on this zoonosis in Brazil have been based on paradigms that did not cover all the elements involved in the zoonosis, thus making it impossible to properly understand the role of these carnivores. Monitoring of plague foci conducted exclusively by means of dog surveys may result in progressive lack of knowledge of the epidemiological situation of plague, if supplementary inter-institutional research is not developed.

Coleções biológicas do Centro de Pesquisas Aggeu Magalhães da Fundação Oswaldo Cruz: análise de um workshop / Biological collections from Aggeu Magalhães Research Center, Oswaldo Cruz Foundation: analysis of a workshop

Sob os auspícios da Vice-Diretoria de Pesquisas, Desenvolvimento Tecnológico e Serviços de Referência do Centro de Pesquisas Aggeu Magalhães (CPqAM) da Fundação Oswaldo Cruz (Fiocruz), foi realizado em 18 de fevereiro de 2009 o I Encontro de Curadores de Coleções Biológicas do CPqAM, tendo como objetivos discutir a legislação aplicada às atividades de coleções biológicas e uniformizar os procedimentos adotados para o gerenciamento e garantia da quantidade dos acervos. No encontro foram apresentadas as quatro relações mantidas no CPqAM, reconhecidas pelo Fórum Permanente de Coleções Biológicas da Fiocruz: Coleções de Bactérias (Coleção de Culturas de Yersinia spp e Coleção de Bactérias NB2); Coleção de Vírus (Banco de Vírus do LaVITE) e Coleção Helmintológica (Laboratório de Esquistossomose). Foram tratados com destaque os aspectos de biossegurança e de biosseguridade. Constatou-se a necessidade de serem aplicados esforços no sentido de solucionar algumas inconformidades relativas a infraestrutura física, disponibilidade de recursos humanos e padronização da documentação, além da informatização dos dados do acervo do CPqAM.

Sifonápteros de roedores no foco de peste da Chapada do Araripe, Pernambuco, Brasil, 2002-2008 / Siphonaptera in rodents in the plague focus in Chapada do Araripe, Pernambuco, Brazil: 2002-2008

Analisou-se, neste estudo, a ocorrência das espécies de sifonápteros, insetos conhecidos vulgarmente por pulgas, que parasitam roedores no foco de peste da Chapada do Araripe, localizada no sertão de Pernambuco, Brasil. A investigação teve como objetivo subsidiar as atividades de controle da peste no Brasil. No período de 2002 a 2008, coletaram-se 1.719 espécimes de pulgas de roedores em nove municípios da área de foco. Foram identificadas quatro espécies de pulga - Polygenis (Polygenis) bohlsi jordani, Polygenis (Polygenis) tripus, Xenopsylla cheopis e Ctenocephalides felis felis - que parasitavam os roedores Necromys lasiurus, Cerradomys spp, Thrichomys apereoides, Galea spixii, Rattus rattus e Mus musculus. O sifonáptero Polygenis (P.) b. jordani foi encontrado em todas as espécies de roedores, exceto em M. musculus; Polygenis (P.) tripus em N. lasirus, T. apereoides e R. rattus; X. cheopis, em R. rattus e M. musculus e, finalmente, C. felis felis, em R. rattus. Nas pulgas analisadas, não foi isolada Yersinia pestis, bacteriologicamente por cultivo e/ou técnicas moleculares. A existência de vetores competentes e de reservatórios naturais evidencia a potencialidade de transmissão da bactéria e, por conseguinte, a necessidade de manutenção e aperfeiçoamento do Sistema de Vigilância da Peste nas áreas de foco. Também justifica a estruturação de um programa de pesquisas com o objetivo de desenvolver, sistematicamente, estudos sobre as pulgas e roedores.

Tendência secular da peste no Estado do Ceará, Brasil / Secular plague trend in Ceará State, Brazil

Após a sua introdução no Ceará, Brasil, em 1900, a peste focalizou-se em sete complexos ecológicos: Chapada do Araripe e Serras da Ibiapaba, do Baturité, do Machado, das Matas, da Pedra Branca e de Uruburetama. As atividades de vigilância nesses focos no período de 1935/2004 foram desenvolvidas sucessivamente pelo Departamento Nacional de Saúde, Serviço Nacional de Peste, Departamento Nacional de Endemias Rurais, Superintendência de Campanhas de Saúde Pública, Fundação Nacional de Saúde e finalmente pela Secretaria de Vigilância em Saúde. A análise dos dados levantados sobre a ocorrência de casos humanos nesses 70 anos permite identificar diferentes padrões de circulação da enfermidade na população humana, caracterizados pela alternância de momentos de elevadas incidências e de silêncio, possibilitando estabelecer uma periodização cronológica com características epidemiológicas próprias. Conclui-se desses resultados que a peste ainda deve ser considerada uma ameaça potencial, o que justifica revitalizar as ações de vigilância epidemiológica, o que só ocorrerá com o fortalecimento de todas as instâncias do Sistema Unico de Saúde.

After its introduction into the State of Ceará, Brazil, in 1900, the plague was established in seven ecological complexes: Chapada do Araripe and the Ibiapaba, Baturité, Machado, Matas, Pedra Branca, and Uruburetama mountains. These natural foci were monitored successively from 1935 to 2004 by the National Health Department, National Plague Service, National Department of Rural Endemics, Superintendency of Public Health Campaigns, National Health Foundation, and finally by the National Health Surveillance Secretariat. Data analysis on human cases during these 70 years allowing identifying different plague circulation patterns in the human population, alternating high incidence with silent periods and characterizing a chronological periodicity with unique epidemiological characteristics, besides concluding that plague should still be considered a potential threat, thus justifying the revitalization of surveillance measures by strengthening all levels in the Unified National Health System.

Contribuição para o diagnóstico de peste / Contribution towards plague diagnosis

Apesar de sua fundamentação clínico-epidemiológica, numerosos casos suspeitos de peste nos focos brasileiros têm sido descartados por serem negativos pelo teste de hemaglutinação para detecção de anticorpos contra o antígeno F1 da Yersinia pestis. A transcendência da peste justifica estudar se tais resultados decorrem da falta de resposta ao F1, e se outras proteínas da Yersinia pestis poderiam ser reconhecidas nos soros suspeitos, sendo desta forma candidatas como alvo diagnóstico alternativo ao F1. Assim sendo, cepas de Yersinia pestis e de Yersinia pseudotuberculosis, uma proteína YopH recombinante e a F1 foram utilizadas para analisar soros de pacientes e soros imunes de coelhos. A F1 e a YopH não foram reconhecidas pelos soros humanos HA- e nenhuma proteína majoritária, comum a todos os soros humanos e coelhos, foi identificada, o que permite concluir que os casos suspeitos devem ser submetidos a uma avaliação clínico-laboratorial mais rigorosa, aprofundando a investigação epidemiológica em busca de outras etiologias.

Despite the clinical-epidemiological features of plague, numerous suspected cases in Brazilian outbreaks have been discarded because of negative results from the hemagglutination test for antibodies against the Yersinia pestis F1 antigen. The transcendence of plague justifies studying whether such results are due to unresponsiveness to F1, and whether other Y. pestis proteins might be recognized in suspect serum. These would therefore be candidates to be alternative diagnostic targets to the F1 antigen. Thus, strains of Y. pestis and Y. pseudotuberculosis, a recombinant YopH protein and the F1 antigen were used to analyze serum from patients and immune serum from rabbits. F1 and YopH were not recognized by HA-negative human serum and no major protein common to all the human and rabbit serum samples was identified. This allows the conclusion that suspected cases must be subjected to more rigorous clinical-laboratory evaluation, with strengthening of epidemiological investigations in the search of other etiologies.

The pgm locus and pigmentation phenotype in Yersinia pestis

The pigmentation (pgm) locus is a large unstable area of the Yersinia pestis chromosome composed of a segment of iron acquisition (HPI) linked to a pigmentation segment. In this work we examined the mobility of HPI and the pigmentation segment in three Y. pestis isolates using successive subcultures on Congo red agar (CRA) plates. Strain P. CE 882 was shown to be highly stable while strains P. Exu 340 and P. Peru 375 dissociated into several phenotypes, PCR analysis showing evidence of changes in the pgm locus of the derived cultures. Strains P. Exu 340 and P. Peru 375 produced previously unreported cultures positive for the pesticin/yersiniabactin outer membrane receptor (psn+) but negative for the iron-regulated protein (irp2-), suggesting the occurrence of rearrangements in this chromosomal region and either a sequential loss or the loss of separated segments. These results provide evidence that besides deletion en bloc, specific rearrangements are also involved in the deletion events for that locus.

Vigilância da peste no Estado do Ceará: 1990-1999 / Surveillance of plague in the State of Ceará: 1990-1999

As atividades de vigilância sorológica da peste nos focos do Estado do Ceará detectaram elevaçäo do número de animais indicadores/sentinela com anticorpos antipestosos a partir de 1995, com pico em 1997 evidenciando aumento da circulaçäo do bacilo pestoso em todos os focos investigados. De um total de 110.725 amostras de soro obtidas de roedores (7.873) e carnívoros domésticos (102.852) analisadas pela técnica de hemaglutinaçäo (HA) para detecçäo de anticorpos contra o antígeno F1 da Yersinia pestis, 905 revelaram-se positivas, sendo 15 de roedores (4 Rattus rattus e 11 Galea spp), 720 de cäes e 170 de gatos. Dos 652 casos humanos suspeitos e contatos investigados apenas dois foram positivos pela HA e um terceiro paciente foi positivo por hemocultura. A cepa isolada revelou-se altamente patogênica para animais de laboratório e mostrou sensibilidade aos antimicrobianos usados no tratamento dos doentes

Homology among extra-cryptic DNA bands and the typical plasmids in brazilian Yersina pestis strains

Yersina pestis, the etiologic agent of plague, harbors three well-characterized plasmids: pFra (90-110kb), pYV (70kb) and pPst (9.5kb). Furthermore, some extra-cryptic DNA bands have been observed in a number of wild strains from several foci of the world. Additional bands have also been reported in Brazilian strains. Looking for any relationship among these cryptic DNA bands and the three-prototypical plasmids, we analyzed twelve strains displaying different plasmid content. The DNA bands were hybridized by southern blot with probes directed at the genes cafl, lcrV and 'pla' located respectively on the plasmids pFra, pYV and pPst. The probes were constructed by PCR amplification and labeled with digoxigenin. The Pla probe hybridized with its target (pPst) and with bands of about 35 kb suggesting some homology among them. The Cafl probe hybridized with the target (pFra) as well as with higher bands. The LcrV also hybridized with the target (pYV) and both with the bands higher than pFra and the bands between pFra and pYV. These results suggest that the large-cryptic bands could represent some rearrangement, open circular or linearized forms of the pFras and pYV plasmids.

A simple PCR-based procedure for plague diagnosis

Triturados de bacos de animais infectados experimentalmente com Y. pestis, suspensos em salina foram fervidos e os sobrenadantes usados diretamente para amplificacao do PCR sem previa extracao do DNA. O limiar de deteccao pode ser aumentado por uma segunda etapa de amplificacao (Nested-PCR). Nao houve infectados usados como controle